Zur quantitativen Bestimmung von Faktor-VIII-Antigen in menschlichen Plasmaproben Plasmaproben und Faktor-VIII-Konzentraten mit Hilfe des Enzymimmunoassays (ELISA) mit zwei Antikörpern Immuno-Sorbent-Assay (ELISA). Dieser Kit ist nur für Forschungszwecke bestimmt und darf nicht für die Diagnose oder Behandlung von Patienten verwendet werden.
Prinzip Die Mikrowells des Teststreifens sind mit einem polyklonalen Schafs-Antikörper gegen humanes FVIII vorbeschichtet. Die Plasmaproben werden verdünnt und in die Mikrowells einpipettiert. Das vorhandene FVIII-Antigen bindet sich an den beschichteten Antikörper. Nach dem Waschen von ungebundenem Material, wird ein mit Peroxidase markierter Schafs-Detektionsantikörper aufgetragen, der sich an das eingefangene FVIII binden. Die Mikrowells werden erneut gewaschen und eine Lösung von TMB (das Peroxidase-Substrat Tetramethylbenzidin) wird hineinpipettiert und für eine bestimmte Zeit lang reagieren. Es entwickelt sich eine blaue Farbe, die sich nach Quenchen der Reaktion mit Säure gelb wird. Die gebildete Farbe wird in einem Mikroplatten-Lesegerät bei 450 nm spektrophotometrisch gemessen. Die Extinktion bei 450 nm ist direkt proportional zu der Menge an FVIII-Antigen.
Eckdaten
Zusätzliche Reagenzien
Bitte beachten Sie unsere Datenschutzerklärung