EIA-Methode für die qualitative Bestimmung der Bindung von dem von Wilebrand Faktor (vWF) an Kollagen (CBA Collagen Binding Activity) in humanem Plasma. Alle Reagenzien sind im Kit enthalten.
vWF ist ein multimeres Protein, das von Endothelzellen und Megakaryozyten produziert wird. Es zirkuliert im Blut in Form von Multimeren im Bereich von 500 bis über 20.000 kDa. Es fördert die Adhäsion von Blutplättchen am Subendothel geschädigter Blutgefäße. Durch die Bindung an FVIII verlängert es dessen Halbwertszeit. Die ultrabreiten vWF-Multimere werden durch ADAMTS-13 gespalten. Die biologische Funktion von vWF hängt weitgehend von der Größe seiner Multimere ab. Große Multimere binden eher an Blutplättchen und Kollagen und fördern die Blutplättchenadhäsion im Blutstrom. Die plasmatische Konzentration des vWFs beträgt 10µg/ml.
Prinzip Das zu testende verdünnte Plasma oder die Probe wird in die mit fibrillärem Kollagen sensibilisierten Vertiefungen der Mikrotiterplatte einpipettiet. Wenn vorhanden, bindet vWF über seine Fähigkeit zur Kollagenbindung an die feste Phase. Nach einem Waschschritt wird das Immunkonjugat, ein an Peroxidase (HRP) gekoppelter polyklonaler Antikörper, eingebracht und bindet an die freien Epitope des immobilisierten vWF. Nach einem Waschschritt wird das TMB-Substrat in die Vertiefungen der Platte eingebracht und es bildet sich eine Färbung. Diese Färbung ist direkt proportional zur Konzentration von humanem vWF:CBA im Plasma oder in der zu testenden Probe.
Schlüsseldaten •12 Streifen mit 8 Mikrovertiefungen •Inklusive Kalibratoren und Kontrollen.
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