Pour la détermination quantitative de l'antigène du facteur XI dans les échantillons de plasma humain par la méthode ELISA en sandwich. Uniquement à des fins de recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic. Le facteur XI est une glycoprotéine de 160 kDa produite dans le foie. Le FXI est composé de deux sous-unités identiques de 80 kDa, reliées par des liaisons disulfure. Le clivage du FXI par le FXII activée ou la thrombine transforme chaque sous-unité en une double chaîne et crée deux sites actifs par molécule. L'activité du FXIa est régulée par les plaquettes et différents inhibiteurs de protéinase tels que l'inhibiteur C1, l'α2-antiplasmine, l'α1-antitrypsine et l'antithrombine. Le seul substrat naturel connu pour le FXIa est le FIX, et le seul cofacteur nécessaire à cette réaction est le calcium ionisé.
Principe Les micropuits de la barette sont recouverts d'anticorps polyclonaux de chèvre contre le FXI humain. Les échantillons de plasma sont dilués et pipetés dans les micropuits. L'antigène FXI présent se lie à l'anticorps des micropuits. Après avoir éliminé par lavage le matériel non lié, un anticorps de détection de chèvre marqué à la peroxydase, qui se lie au FXI capturé, est pipeté dans les micropuits. Les micropuits sont ensuite lavés et une solution de TMB (substrat de peroxydase tétraméthylbenzidine) y est pipetée, qui doit réagir pendant un certain temps. Une couleur bleue se développe, qui se transforme en une couleur jaune après avoir arrêté la réaction avec une solution d'acide. La couleur formée est mesurée par spectrophotométrie à 450 nm dans un lecteur de microplaques. L'absorbance à 450 nm est directement proportionnelle à la quantité d'antigène FXI fixée dans le puits.
Données clés
Réactifs associés
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