Sandwich-ELISA-Methode für die spezifische quantitative Bestimmung von freiem Protein S (PS) (Cofaktor von aktiviertem Protein C) in menschlichem Plasma oder einem anderen biologischen Medium. Protein S, das mit C4b-BP komplexiert ist, wird nicht gemessen. Alle Reagenzien sind im Kit enthalten.
PS ist ein in der Leber synthetisiertes Vitamin-K-abhängiges Protein mit einem Molekulargewicht von 80 kDa. Das Gleichgewicht zwischen der freien und der gebundenen Form spielt eine wichtige Rolle, da nur die freie Form aktiv ist. Freies PS ist ein Cofaktor von aktiviertem PC und ein physiologischer Gerinnungshemmer. Die normale PS-Konzentration liegt bei 25 µg/ml. 40% des gesamten PS (bzw. 10 µg/ml) zirkuliert in freier Form und 60% (bzw. 15 µg/ml) zirkuliert im Blut in Form eines Komplexes mit C4b-BP. Sein Spiegel sinkt in den frühen Stadien entzündlicher Erkrankungen und bei Lebererkrankungen.
Prinzip: Zunächst wird das Immunkonjugat, ein monoklonaler Maus-Antikörper, spezifisch für freies PS, der an Peroxidase gekoppelt ist, in die Vertiefung der Mikrotiterplatte pipettiert, die mit einem anderen monoklonalen Antikörper, der spezifisch für freies PS ist, sensibilisiert wurde. Unmittelbar danach wird die Testprobe in die Vertiefung gegeben. Bei Vorhandensein bindet das freie SP über eines seiner freien Epitope an den immobilisierten Antikörper und über ein zweites freies Epitop an das Immunokonjugat. Nach dem Waschen wird das TMB-Substrat in die Vertiefung eingebracht und es bildet sich eine Färbung. Die Färbung ist proportional zur Menge an freiem PS, die in der getesteten Probe vorhanden ist.
Eckdaten:
Bitte beachten Sie unsere Datenschutzerklärung