Méthode ELISA Sandwich pour la détermination quantitative spécifique de la protéine S (PS) libre (cofacteur de la protéine C activée) dans le plasma humain ou tout autre milieu biologique. La protéine S complexée à la C4b-BP n'est pas mesurée. Tous les réactifs sont inclus dans le kit.
La PS est une protéine vitamine K dépendante synthétisée dans le foie avec un poids moléculaire de 80 kDa. L'équilibre entre la forme libre et la forme liée joue un rôle important car seule la forme libre est active est active. La PS libre, cofacteur de la PC activée, est un inhibiteur physiologique de la coagulation. La concentration de PS normale s'élève à 25 µg/ml. 40% de la PS totale (soit 10µg/ml) circule sous forme libre et 60% (soit 15µg/ml) circule dans le sang sous forme complexée avec la C4b-BP. Son taux diminue lors des étapes précoces des maladies inflammatoires et dans les maladies hépatiques.
Principe : Dans un premier temps l'immunoconjugué, anticorps monoclonal de souris anti PS libre couplé à la péroxydase, est pipettée dans le puit de la plaque microtitre sensibilisée avec un autre anticorps monoclonal spécifique de la PS libre. Immédiatement après, l'échantillon à tester est introduit dans le puit. En cas de présence, la PS libre se fixe sur l'anticorps immobilisé par l'un de ses épitopes et se lie à l'immunoconjugué par un second épitope. Après lavage le substrat TMB est ajouté dans le puit et une coloration se forme. La coloration est proportionelle à la quantité de PS libre présente dans l'échantillon testé.
Données clé :
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