Sandwich-ELISA-Methode für die quantitative Bestimmung des gesamten Gewebefaktors (full length) in menschlichem Plasma, biologischen Medien oder gereinigten Präparaten. Inklusive Kalibratoren und Kontrollen, bei denen es sich um rekombinante Produkte handelt (1-263). FT ist der physiologische Initiator der Blutgerinnung. Es ist ein Transmembranprotein, das von Endothelzellen synthetisiert wird. FT bindet an Faktor VIIa, um einen FVIIa-FT-Komplex zu bilden, der FIX und FX zu FIXa bzw. FXa aktiviert.
Prinzip: Zunächst werden die AE-TF-Lösung und die zu testende Probe in die Vertiefungen der Platte pipettiert, die mit einem FL-FT-spezifischen monoklonalen Antikörper sensibilisiert wurde. Das in der Probe vorhandene FL-FT bindet sich über eines seiner Epitope an die feste Phase. In einem zweiten Schritt wird ein Biotin-gekoppelter monoklonaler Antikörper, der für ein anderes Epitop spezifisch ist, eingeführt und bindet sich an das auf der Platte immobilisierte FL-FT. Im dritten Schritt wird ein Horseradish Peroxidase-Streptavidin-Konjugat hinzugefügt und bindet an den biotinylierten Antikörper. Das Peroxidase-Substrat (TMB-HS) wird in Gegenwart von Wasserstoffperoxid in die Vertiefungen eingebracht und es bildet sich eine blaue Färbung. Diese Färbung ist direkt proportional zur Menge an menschlichem FL-FT, die in der zu bestimmenden Probe vorhanden ist.
Schlüsseldaten:
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