Sandwich-ELISA-Methode für die quantitative Bestimmung des Tissue Plasminogen Activator (t-PA)-Antigens in menschlichem Plasma oder anderen biologischen Medien oder biologischen Konzentraten. Alle Reagenzien sind im Kit enthalten. t-PA ist ein 68 kDa großes Protein, das von Endothelzellen synthetisiert und sezerniert wird. Es initiiert die Fibrinolyse durch Aktivierung von Plasminogen zu Plasmin an der Oberfläche des Gerinnsels. Im Blut wird es schnell durch PAI-1 gehemmt, das in der Regel im Überschuss vorhanden ist. t-PA wird größtenteils mit PAI-1 komplexiert und ist dadurch inaktiv. Die normale Plasmakonzentration von t-PA liegt bei < 10 ng/ml. Dieser Wert steigt mit Stress, körperlicher Betätigung und dem Alter an.
Prinzip : Die zu testende Probe wird in die Vertiefung der Mikrotiterplatte pipettiert, die mit einem für t-PA spezifischen monoklonalen Antikörper sensibilisiert wurde. Ist t-PA vorhanden, wird es an die Mikrotiterplatte gebunden. Nach dem Waschen wird das t-PA-spezifische Immunokonjugat, ein monoklonaler Antikörper, der an Peroxidase gekoppelt ist, in die Vertiefung gegeben und an das immobilisierte t-PA gebunden. Nach dem Waschen wird das TMB-Substrat hinzugefügt und es bildet sich eine Färbung. Diese Färbung ist proportional zur Menge an t-PA, die in der zu testenden Probe vorhanden ist.
Schlüsseldaten :
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